'

Клеточные технологии в лечении социально-значимых заболеваний

Понравилась презентация – покажи это...





Слайд 0

Клеточные технологии в лечении социально-значимых заболеваний Д. В. Гольдштейн профессор, доктор биологических наук


Слайд 1

Крупнейшие открытия биологии в XX веке Открытие двойной спирали ДНК (1953) Расшифровка генома человека (2001) Выделение эмбриональных стволовых клеток человека (1998)


Слайд 2

Марио Капечи Мартин Эванс Оливер Смитис Открытие принципов введения специфических генных модификаций у мышей с использованием эмбриональных стволовых клеток Лауреаты Нобелевской премии по физиологии и медицине за 2007 год


Слайд 3

Медицинская и социальная значимость проблемы Вложения в биотехнологические компании превышают 30 миллиардов долларов в год Клеточные технологии необходимы более чем 128 млн. пациентов Данные по США


Слайд 4

Клеточные технологии – приоритетное направление развития медицинской науки (Решение 76-й сессии РАМН от 17.02.2004) Клеточные технологии внесены в Перечень критических технологий РФ (Пр-842 Президента РФ от 21.05.2006) Правительственная комиссия по высоким технологиям и инновациям (Протокол №2 от 23.09.2008)


Слайд 5

Зарегистрированные FDA клинические испытания


Слайд 6

Клеточно-генные технологии для лечения диабета Распространение диабета в мире постепенно достигает эпидемических масштабов Сегодня более 5 миллионов человек по всему миру больны диабетом первого типа, 395 тысяч из них – дети. Ежегодно число больных увеличивается на 5-7%, а каждые 12-15 лет - удваивается Высокая смертность и ранняя инвалидизация


Слайд 7

Методы лечения диабета I типа Инсулинотерапия Трансплантация поджелудочной железы (островков Лангерганса) Клеточные технологии и клеточно-генные технологии


Слайд 8

Pdx-1 (IDX-1/ STF-1/ IPF-1) – ключевой фактор в развитии поджелудочной железы (ПЖ) Экспрессия Pdx-1 начинается в эпителии первичной кишечной трубки (около 30 дней эмбрионального развития) в ограниченной области Эмбрионы мыши, имеющие мутацию по гену Pdx-1, погибают в первые дни после рождения (отсутствует морфогенез ПЖ) Во взрослой ПЖ Pdx-1 экспрессируется только в ?-клетках и очагах неогенеза эндокринной ткани Pdx-1 необходим для экспрессии нескольких генов ?-клеток : инсулина, амилина, глюкокиназы, GLUT-2


Слайд 9

Основные этапы технологии Забор жировой ткани пациента Изоляция МСК ЖТ Селекция периваскулярной фракции МСК ЖТ Культивирование в селективной среде Трансфекция культуры клеток rAd5-PDX-1 Созревание «островков», продуцирующих инсулин


Слайд 10

Получение рекомбинантного аденовируса 5 серотипа, несущего ген Pdx-1 (pAd5-Pdx1) Плазмида pAd5- Pdx1 способность инфицировать неделящиеся клетки большая емкость (до 28 т.п.н.), позволяющая клонировать практически любой ген человека высокий титр вирионов (до 10^11) при выделении из упаковочной линии автономную локализацию, исключающую опасность инсерций в геном разрешены к применению в генной терапии Преимущества аденовирусных векторов:


Слайд 11

Сравнительная эффективность трансдифференцировки МСК ЖТ в общей и в изолированной популяции Общая популяция Изолированная популяция


Слайд 12

Влияние различных индукторов дифференцировки на уровень мРНК гена Insulin в трансфицированных клетках периваскулярного фенотипа * * * 1 -контроль 2 - трансфицированные клетки в базовой среде 3 - в среде CMRL-1066 4 - в среде CMRL-1066 с GLP-1, 5- в среде CMRL-1066 с ретиноевой кислотой 6 - в среде CMRL-1066 с никотинамидом 7 - в среде CMRL-1066 с ретиноевой кислотой, GLP-1 и никотинамидом 8 - в среде CMRL-1066 с GLP-1 и ретиноевой кислотой. * - p<0,05 Относительный уровень мРНК * * * * * * *


Слайд 13

Секреция инсулина трансфицированными МСК периваскулярного фенотипа из ЖТ и ПК Pdx-1 инсулин Pdx-1/ инсулин


Слайд 14

Секреция инсулина трансфицированными МСК периваскулярного фенотипа из ЖТ и ПК Количество инсулина в среде (мЕ/л) при добавлении глюкозы 1 - среда с не трансфицированных клеток 2 - среда с трансфицированных клеток с содержанием глюкозы 5,56 mmol/л 3 - среда с трансфицированных клеток с содержанием глюкозы 25 mmol/л * - р<0,05 * *


Слайд 15

Инсулин-продуцирующие островки in vitro Впервые разработан метод получения функционально активных инсулин-продуцирующих клеток из популяций МСК жировой ткани и пупочного канатика человека периваскулярного фенотипа (CD146+CD31-) путем транзиентной трансфекции геном Pdx1 с добавлением этапа культивирования в дифференцировочной среде


Слайд 16

Спасибо за внимание!


×

HTML:





Ссылка: