'

ЗАО «ЭКОлаб» лабораторная диагностика сифилиса

Понравилась презентация – покажи это...





Слайд 0

ЗАО «ЭКОлаб» лабораторная диагностика сифилиса Амелина Е.А. начальник отдела перспективных разработок , К.Б.Н.


Слайд 1

Динамика заболеваемости сифилисом в Российской Федерации (1992-2009 гг.) [на 100 тыс.населения]


Слайд 2

Динамика заболеваемости сифилисом по федеральным округам РФ (2005-2009 гг.) [на 100 тыс. населения]


Слайд 3

Заболеваемость сифилисом в странах Европы [на 100 000 населения] 2008 г. <= 80 <= 64 <= 48 <= 32 <= 16 No data Min = 0 Source: WHO/Europe, European HFA Database, July 2010 European Region 16.2 Russian Federation 59.9


Слайд 4

Перераспределение в структуре скрытого сифилиса с возрастанием эпидемически опасных ранних форм инфекции Рост осложнений: мертворождения, врождённый сифилис, нейросифилис, третичный сифилис, серорезистентность Оседание в стационарах соматического профиля до 30-32% от всех зарегистрированных случаев


Слайд 5

Серологические исследования являются в настоящее время основным элементом клинической лабораторной диагностики сифилиса. Они решают три задачи: скрининг на сифилис; диагностика сифилиса при наличии подозрений на него; контроль эффективности лечения диагностированного сифилиса


Слайд 6

Методы диагностики сифилиса 8 Окончательный диагноз Предварительный диагноз


Слайд 7

ПЦР-исследование наT.pallidum Все ПЦР – тесты собственного производства перед использованием должны быть апробированы путем тестирования: не менее 10 образцов от больных сифилисом, положительных в методе ТПМ (образец) с положительными серореакциями (кровь) не менее 10 образцов от пациентов, у которых в методе ТПМ (образец)и при серологическом исследовании (кровь) получен отрицательный результат В настоящее время ПЦР для диагностики сифилиса имеет исследовательский статус


Слайд 8

Нетрепонемные тесты Сифилис VDRL –тест (Veneral Disease Research Laboratory) Рекомендован к применению ВОЗ Микрофлокуляционный тест на основе кардиолипинового антигена Применение микроскопа с Х100 позволяет рассмотреть микрокомплексы АГ-АТ Исследование образцов cмж редко даёт ложноположительный результат в отличие от исследования инактивированной сыворотки Традиционный диагностический тест для постановки диагноза нейросифилиса Мониторинг эффективности лечения


Слайд 9

РИФ – реакция иммунофлуоресценции (FTA Fluorescent treponemal antibody) набор реагентов для определения антител к антигенам T.pallidum Сифилис-IgG-РИФ и Сифилис-IgM-РИФ


Слайд 10

Рекомендации по применению отдельных ТТ РИФ (в особенности РИФабс ) считается наиболее чувствительным тестом на сифилис и принята в качестве «золотого стандарта» среди ТТ. Чувствительность при первичном сифилисе - 70-100%, при вторичном и позднем - 96-100%, специфичность – 94-100% Показания к применению: «золотой стандарт» подтверждающего теста на сифилис Ограничения применения: не может использоваться при скрининге ввиду трудоемкости ручной методики исследования, необходимости использования флуоресцентного микроскопа, субъективности оценки результатов теста


Слайд 11

Трепонемные тесты ИФА-Антипаллидум-скрин ИФА-Антипаллидум-одностадийный ИФА-Антипаллидум-IgG (Аналитическая чувствительность методов–0,01- 0,02 МЕ/мл) ИФА-Антипаллидум-IgM Сифилис РПГА-тест (Аналитическая чувствительность метода –0,05МЕ/мл) Все системы контролируются международным стандартом ВОЗ(NIBS, London, UK) для выпуска с одинаковой аналитической чувствительностью всех серий


Слайд 12

ТТ не могут быть использованы для контроля эффективности проведенной специфической терапии, так как антитрепонемные антитела могут длительно циркулировать в организме больного, перенесшего сифилитическую инфекцию Дают положительные результаты при тропических трепонематозах (фрамбезия - вызывается T.pertenue и пинта - вызывается T.carateum) Могут давать ложные положительные реакции у больных с аутоиммунными заболеваниями, проказой, онкологической и эндокринной патологией, а также и при некоторых других заболеваниях и состояниях Ограничения применения ТТ


Слайд 13

Лайн-Блот Сифилис Вариант иммуноферментного анализа в формате линейного блота для регистрации антител к наиболее иммуногенным детерминантам


Слайд 14

Расположение антигенов в Лайн Блот Сифилис Контроли Антигены TpN47 TpN17 TpN15 TmpA 3+ 1+ ± Контроль А/г


Слайд 15

Принцип технологии иммуноблоттинга Иммобилизация на нитроцеллюлозную мембрану рекомбинантных белков - аналогов антигенов Treponema pallidum p17, p 47, p 41, p15 Проведение иммуноферментного анализа для одновременного дифференцированного выявления антител к каждому из нанесённых на мембрану антигенов Антитела к белкам T. pallidum в разной степени регистрируются на всех стадиях инфекции Выявлена зависимость появления антител к различным белкам на разных стадиях инфекции


Слайд 16

Оценка интенсивности антителообразования к белкам T.pallidum у больных сифилисом Условные ед. «+»


Слайд 17

Интенсивность антителообразования к белкам T.pallidum у пациентов после перенесенного сифилиса стадия заболевания Условные ед. «+»


Слайд 18

Реактивность сыворотки оценивают по каждому антигену отдельно, путём сравнения интенсивности окрашивания полученных полос с окрашиванием трёх калибровочных линий Отслеживание белкового профиля помогает при уточнении стадии инфекции и в оценке эффективности проведённого лечения


Слайд 19

Частота выявления антител к основным иммунореактивным белкам Tr.Pallidum TpN15 – 67,5% TpN17 – 98,5% TmpA – 95,0% TpN47 – 92,5% За счет высокой степени очистки рекомбинантных антигенов и одновременного выявления антител к наиболее иммуногенным детерминантам возбудителя сифилиса метод обладает высокой чувствительностью ( 99,6-100%) и специфичностью (100%), что позволяет рассматривать его как новый подтверждающий тест на сифилис.


Слайд 20

Применение метода иммуноблоттинга целесообразно: Для ранней диагностики сифилиса. В возможном инкубационном периоде и при первичном сифилисе Для подтверждения диагноза скрытого раннего сифилиса ( при противоречивых результатах традиционных серологических методов) При необходимости проведения дифференциальной диагностики с л/положительными результатами серологических реакций на сифилис, особенно, при аутоиммунных заболеваниях: ревматизме,СКВ В сложных диагностических ситуациях, как референс-метод. При оценке результатов лечения При необходимости установления ретроспективного диагноза. 21


Слайд 21

Основные характеристики : Общее время постановки - 2ч 45 мин Необходимый объем сыворотки (плазмы) или ликвора – 20 мкл. Срок годности набора – 12 месяцев. Число определений, включая контрольные образцы –24 Специфичность и чувствительность при оценке на сыворотках панелей МБС – 100 %. Преимущества: Действует принцип: «Один пациент – одна тест-полоска – один результат» Возможность тестирования образцов ликвора Все компоненты тест-системы - окрашенные жидкие реагенты -готовы к использованию и не требуют дополнительного разведения Возможность проведения реакции ИБ c использованием анализаторов.


Слайд 22

Автоматическая станция ProfiBlot 48 для исследования в иммуноблоттинге


Слайд 23

Основные направления развития диагностики сифилиса Автоматизация и объективизация выполнения исследований (роботизированные станции, фотометры)


Слайд 24

Спасибо за внимание !


×

HTML:





Ссылка: