'

Wet Lab

Понравилась презентация – покажи это...





Слайд 0

Wet Lab Смирнов Арсений Пензенцева Евгения


Слайд 1

2


Слайд 2

ДНК (4 нуклеотида: А, Т, G, C) 3


Слайд 3

Выделение ДНК 4


Слайд 4

Выделение ДНК 5


Слайд 5

Оценка качества и количества ДНК Электрофорез Спектрофотометрия Флуорометрия элетрофорез спектрофотометрия С[µg/ml] = А260 x K K (dsDNA) = 50 K (ssDNA) = 37 K (ssRNA) = 40 А260 /А280 = 1,8-1,9 – чистая ДНК 6


Слайд 6

Электрофорез 7


Слайд 7

Плазмиды 8 Состав вектора: Ориджин репликации Селективный маркёр Полилинкер


Слайд 8

pBluescript II SK (+) 9


Слайд 9

Севенирование ДНК - прочтение последовательности Классические методы: Максам-Гилберт (химическое) Сэнгер (энзиматическое) 10


Слайд 10

Секвенирование (Сэнгер) 11


Слайд 11

Автоматическое секвенирование 12


Слайд 12

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 1983 г, Кэри Муллис – метод, позволяющий избирательно синтезировать большие количества определённых фрагментов ДНК «Полимеразная» - используется фермент ДНК-полимераза «Цепная» - состоит из повторяющихся циклов, количество ДНК с каждым циклом увеличивается в геометрической прогрессии 13


Слайд 13

Компоненты ПЦР Буфер 14


Слайд 14

Суть ПЦР 15


Слайд 15

Этапы ПЦР 16


Слайд 16

Амплификаторы Термостатирование: твёрдый термоблок (элемент Пельтье) жидкость поток воздуха 17


Слайд 17

ПЦР в реальном времени (Real-time PCR) одновременная амплификация и измерение количества продукта наличие флюоресцентного красителя в смеси наличие оптического блока в амплификаторе 18


Слайд 18

Системы детекции Неспецифичные интеркалирующие красители (SYBR Green и др.) Специфичные линейные разрушаемые пробы (TaqMan) «молекулярные маячки» (beacons) примыкающие пробы 19


Слайд 19

Линейные разрушаемые пробы (TaqMan = Taq-polymerase + Pac-Man) 20


Слайд 20

21 Непрямые антикоагулянты: варфарин аценокумарол фенпрокумон кумарин Фармакогенетика препаратов для лечения тромбозов


Слайд 21

22 Заболевания, при которых назначают непрямые антикоагулянты: Венозные тромбозы Легочная тромбоэмболия Тромбоэмболические осложнения, связанные с мерцательной аритмией и трансплантацией сердечных клапанов Инфаркт миокарда: снижение риска смерти, повторного инфаркта миокарда и случаев тромбоэмболических осложнений


Слайд 22

23 Нежелательные лекарственные реакции (НЛР) – кровотечения. МНО (международное нормализованное отношение). При применении варфарина частота кровотечений достигает 25%. Факторы риска кровотечений при применении непрямых антикоагулянтов: Сопутствующие заболевания Применение других препаратов Нарушение дозировки Индивидуальная чувствительность Непрямые антикоагулянты – антагонисты витамина К1


Слайд 23

24 Метаболизм витамина К1 (factor II, VII, IX, X, protein C, S, Z)


Слайд 24

25 Полиморфизм гена CYP2C9 Аллельные варианты гена: CYP2C9*1 – нормальная каталитическая активность CYP2C9*2 (Arg144Cys) - пониженная каталитическая активность CYP2C9*3 (Ile359Leu) – выраженная пониженная каталитическая активность ATT 1075 Ile Exon 3 Exon 7 TGT ATT 430 1075 Cys Ile Exon 3 Exon 7 CGT CTT 430 1075 Arg Leu


Слайд 25

26 Снижение дозы варфарина в зависимости от генотипа CYP2C9 (Lindh et al.,2009) Частоты аллелей в европейской популяции: CYP2C9*2 – 10%, CYP2C9*3 – 6%


×

HTML:





Ссылка: